RNAsimple Kit d'ARN total

Per a l’extracció d’ARN total d’alta eficiència mitjançant la columna centrífuga àmpliament utilitzada.

El kit RNAsimple Total RNA adopta un nou mètode d’extracció d’ARN basat en el mètode d’isotiocianat / fenol de guanidini. El buffer RZ dissenyat específicament per TIANGEN pot eliminar l'ADN genòmic i les proteïnes de les cèl·lules de forma ràpida i eficient, fent que l'ARN obtingut sigui altament pur i estable.
Aquest kit s’utilitza per separar l’ARN total de la sang, les cèl·lules animals, els teixits i els teixits vegetals. Cada columna de rotació pot processar 50-100 mg de teixit o 5 × 106cèl·lules alhora i poden processar un gran nombre de mostres simultàniament. La reacció es pot completar en menys d'una hora i l'ARN total extret té un rendiment més alt, una puresa millor, sense contaminació d'ADN i proteïnes, i es pot utilitzar en diversos experiments posteriors.

Gat. No Mida de l’embalatge
4992858 50 preparacions

Detall del producte

Flux de treball

Exemple experimental

Preguntes freqüents

Etiquetes de producte

Característiques

■ L'RNA llest per utilitzar d'alta puresa és adequat per a aplicacions sensibles aigües avall.
■ Aplicacions àmplies: l'ARN purificat es pot aplicar a diverses mostres experimentals.
■ L'experiment es pot completar en 1 hora amb operacions senzilles.

Aplicacions

■ RT-PCR
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR en temps real
■ Screening PolyA, traducció in vitro, anàlisi de protecció RNase, clonació molecular.

Tots els productes es poden personalitzar per ODM / OEM. Per obtenir més informació,feu clic a Servei personalitzat (ODM / OEM)


  • Anterior:
  • Pròxim:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    Workflow

    Experimental Example Material: teixit de melsa de rata de 20 mg
    Mètode: es va aïllar l'ARN total del teixit de melsa de rata mitjançant el kit RNAsimple Total RNA.
    Resultats: vegeu la imatge anterior d’electroforesi en gel d’agarosa. Es van carregar 2-4 μl de 100 μl d’eluats per carril. L'electroforesi es va dur a terme a 6 V / cm durant 30 minuts amb una agarosa a l'1%.
    P: bloqueig de columnes

    A-1 La lisi o homogeneïtzació cel·lular no és suficient

    ---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.

    A-2 La quantitat de mostra és massa gran

    ---- Reduir la quantitat de mostra utilitzada o augmentar la quantitat de tampó de lisi.

    P: Baix rendiment d'ARN

    A-1 Lisi o homogeneïtzació cel·lular insuficients

    ---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.

    A-2 La quantitat de mostra és massa gran

    ---- Consulteu la capacitat màxima de processament.

    L’ARN A-3 no s’elueix completament des de la columna

    ---- Després d'afegir aigua lliure de RNasa, deixeu-la uns minuts abans de centrifugar-la.

    A-4 Etanol a l'eluent

    ---- Després d’esbandir, centrifugueu de nou i traieu el tampó de rentat tant com sigui possible.

    A-5 El medi de cultiu cel·lular no s’elimina completament

    ---- Quan recopileu cèl·lules, assegureu-vos d’eliminar el medi de cultiu al màxim.

    A-6 Les cèl·lules emmagatzemades a RNAstore no es centrifugen eficaçment

    ---- La densitat de magatzem d’ARN és superior a la mitjana de cultiu cel·lular; de manera que s’hauria d’incrementar la força centrífuga. Es suggereix centrifugar a 3000x g.

    A-7 Baix contingut i abundància d'ARN a la mostra

    ---- Utilitzeu una mostra positiva per determinar si la mostra produeix un baix rendiment.

    P: Degradació de l'ARN

    A-1 El material no és fresc

    ---- Els teixits frescos s’han d’emmagatzemar en nitrogen líquid immediatament o immediatament posats al reactiu RNAstore per garantir l’efecte d’extracció.

    A-2 La quantitat de mostra és massa gran

    ---- Reduir la quantitat de mostra.

    A-3 RNase contamination

    ---- Tot i que la memòria intermèdia proporcionada al kit no conté RNasa, és fàcil contaminar-la durant el procés d’extracció i s’ha de manipular amb cura.

    A-4 Contaminació per electroforesi

    ---- Substituïu la memòria intermèdia d'electroforesi i assegureu-vos que els consumibles i la memòria intermèdia de càrrega estiguin lliures de contaminació per RNase.

    A-5 Massa càrrega per electroforesi

    ---- Reduïu la quantitat de càrrega de la mostra, la càrrega de cada pou no hauria de superar els 2 μg.

    P: Contaminació de l'ADN

    A-1 La quantitat de mostra és massa gran

    ---- Reduir la quantitat de mostra.

    A-2 Algunes mostres tenen un alt contingut d’ADN i es poden tractar amb DNasa.

    ---- Realitzeu un tractament amb DNasa sense RNasa a la solució d’ARN obtinguda, i l’ARN es pot utilitzar directament per a experiments posteriors després del tractament o es pot purificar amb kits de purificació d’ARN.

    P: Com eliminar RNase dels consumibles experimentals i dels objectes de vidre?

    Per a vidres, cuits a 150 ° C durant 4 h. Per a envasos de plàstic, submergits en NaOH 0,5 M durant 10 min, després esbandits a fons amb aigua sense RNasa i esterilitzeu-los per eliminar completament la RNasa. Els reactius o solucions utilitzats a l’experiment, especialment l’aigua, han d’estar lliures de RNasa. Utilitzeu aigua lliure de RNasa per a totes les preparacions de reactius (afegiu aigua a una ampolla de vidre neta, afegiu DEPC a una concentració final del 0,1% (V / V), agiteu durant la nit i feu l'autoclau).

    Escriviu aquí el vostre missatge i envieu-nos-el