RNAprep Pure Micro Kit

Per a la purificació de l'ARN total d'alta qualitat a partir de micro quantitat de teixits o cèl·lules.

El RNAprep Pure Micro Kit utilitza una columna d’adsorció centrífuga específica d’àcid nucleic altament eficient i un sistema de tampó únic per extreure ràpidament l’ARN total d’una àmplia gamma de diferents tipus de micromostres. Aquest kit inclou ARN portador, que pot capturar fàcilment traces d’àcids nucleics del sistema. L'extracció d'ARN mitjançant aquest kit és convenient, ràpida i reproduïble amb un alt rendiment. La reacció es pot completar en 30-40 minuts. El kit pot eliminar selectivament tots els ARN que són <200 nt (5.8S rRNA, 5S rRNA i tRNA, etc.), alhora que enriqueixen, aïllen i purifiquen tots els ARN que són> 200 nt. L’ARN total extret és extremadament pur i lliure de contaminació per ADN i proteïnes.

Gat. No	Mida de l’embalatge
4992859	50 preparacions

Envieu-nos un correu electrònic

Detall del producte

Exemple experimental

Preguntes freqüents

Etiquetes de producte

Característiques

■ Capaç de purificar ARN d'alta qualitat a partir de mostres de quantitat de traces, com ara teixits micro-dissecats, teixits fibrosos i cèl·lules.
■ La DNasa I única minimitza la contaminació de l'ADN genòmic.
■ L'ARN de gran puresa i llest per utilitzar és adequat per a aplicacions sensibles aigües avall.
■ No es necessita extracció de fenol / cloroform, ni precipitació de LiCl ni etanol, ni cal centrifugació en gradient de CsCl, cosa que fa que el procés sigui segur i fiable.

Aplicacions

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR en temps real.
■ Anàlisi de xips.
■ Screening PolyA, traducció in vitro, anàlisi de protecció RNase i clonació molecular.

Tots els productes es poden personalitzar per ODM / OEM. Per obtenir més informació,feu clic a Servei personalitzat (ODM / OEM)

Anterior: RNAsimple Kit d'ARN total

Pròxim: Reactiu universal TRNzol

ARN total d’1 × 10⁶, 1 × 10⁵, 1 × 10⁴, 1 × 10³, 1 × 10², Es van extreure 10 cèl·lules Hela mitjançant RNAprep Pure Micro Kit. RT-qPCR es va realitzar amb el kit Quant qRT-PCR (SYBR Green) de TIANGEN.

P: bloqueig de columnes

A-1 La lisi o homogeneïtzació cel·lular no és suficient

---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.

A-2 La quantitat de mostra és massa gran

---- Reduir la quantitat de mostra utilitzada o augmentar la quantitat de tampó de lisi.

P: Baix rendiment d'ARN

A-1 Lisi o homogeneïtzació cel·lular insuficients

---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.

A-2 La quantitat de mostra és massa gran

---- Consulteu la capacitat màxima de processament.

L’ARN A-3 no s’elueix completament des de la columna

---- Després d'afegir aigua lliure de RNasa, deixeu-la uns minuts abans de centrifugar-la.

A-4 Etanol a l'eluent

---- Després d’esbandir, centrifugueu de nou i traieu el tampó de rentat tant com sigui possible.

A-5 El medi de cultiu cel·lular no s’elimina completament

---- Quan recopileu cèl·lules, assegureu-vos d’eliminar el medi de cultiu al màxim.

A-6 Les cèl·lules emmagatzemades a RNAstore no es centrifugen eficaçment

---- La densitat de magatzem d’ARN és superior a la mitjana de cultiu cel·lular; de manera que s’hauria d’incrementar la força centrífuga. Es suggereix centrifugar a 3000x g.

A-7 Baix contingut i abundància d'ARN a la mostra

---- Utilitzeu una mostra positiva per determinar si la mostra produeix un baix rendiment.

P: Degradació de l'ARN

A-1 El material no és fresc

---- Els teixits frescos s’han d’emmagatzemar en nitrogen líquid immediatament o immediatament posats al reactiu RNAstore per garantir l’efecte d’extracció.

A-2 La quantitat de mostra és massa gran

---- Reduir la quantitat de mostra.

A-3 RNase contamination

---- Tot i que la memòria intermèdia proporcionada al kit no conté RNasa, és fàcil contaminar-la durant el procés d’extracció i s’ha de manipular amb cura.

A-4 Contaminació per electroforesi

---- Substituïu la memòria intermèdia d'electroforesi i assegureu-vos que els consumibles i la memòria intermèdia de càrrega estiguin lliures de contaminació per RNase.

A-5 Massa càrrega per electroforesi

---- Reduïu la quantitat de càrrega de la mostra, la càrrega de cada pou no hauria de superar els 2 μg.

P: Contaminació de l'ADN

A-1 La quantitat de mostra és massa gran

---- Reduir la quantitat de mostra.

A-2 Algunes mostres tenen un alt contingut d’ADN i es poden tractar amb DNasa.

---- Realitzeu un tractament amb DNasa sense RNasa a la solució d’ARN obtinguda, i l’ARN es pot utilitzar directament per a experiments posteriors després del tractament o es pot purificar amb kits de purificació d’ARN.

P: Com eliminar RNase dels consumibles experimentals i dels objectes de vidre?

Per a vidres, cuits a 150 ° C durant 4 h. Per a envasos de plàstic, submergits en NaOH 0,5 M durant 10 min, després esbandits a fons amb aigua sense RNasa i esterilitzeu-los per eliminar completament la RNasa. Els reactius o solucions utilitzats a l’experiment, especialment l’aigua, han d’estar lliures de RNasa. Utilitzeu aigua lliure de RNasa per a totes les preparacions de reactius (afegiu aigua a una ampolla de vidre neta, afegiu DEPC a una concentració final del 0,1% (V / V), agiteu durant la nit i feu l'autoclau).

Escriviu aquí el vostre missatge i envieu-nos-el