■ Alta flexibilitat: rang salvatge de volum de mostra inicial, adequat per a l'extracció de mostres de gran volum en una sola reacció.
■ Rendiment elevat: el mètode de precipitació maximitza el rendiment d'ARN de la mostra.
■ Ús ampli: apte per a moltes mostres diferents, com ara teixits vegetals i animals, cèl·lules cultivades, sang, líquid corporal, etc.
■ Funcionament ràpid: es pot obtenir ADN genòmic en 1 hora ..
Tipus: Basat en les precipitacions
Mostra: Virus, bacteris, fongs, animals, teixits vegetals, cèl·lules cultivades i fluid corporal.
Objectiu: ARN
Temps d'operació: ~ 1 hora
Aplicacions: El reactiu universal TRNzol minimitza la contaminació d’impureses com l’ADN i les proteïnes en l’ARN total purificat i es pot utilitzar directament per a diversos experiments de biologia molecular com ara Northern Blot, Dot Blot, PolyA screening, traducció in vitro, anàlisi de protecció RNase, construcció de biblioteca de cDNA , RT-PCR, PCR en temps real i seqüenciació d’alt rendiment.
Tots els productes es poden personalitzar per ODM / OEM. Per obtenir més informació,feu clic a Servei personalitzat (ODM / OEM)
Mètode: 30 mg de teixit hepàtic de rata, 100 mg de fulles d'arròs es van recollir mitjançant una mòlta de nitrogen líquid; 1 × 106Es van recollir per centrifugació cèl·lules cultivades HepG2 i 700 μl de medi de cultiu Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9). Es van afegir 1 ml de reactiu universal TRNzol de TIANGEN i els productes rellevants del proveïdor L i T a cada alíquota de la mostra i es va realitzar l'extracció d'ARN seguint els protocols proporcionats per cada proveïdor. El volum d’elució va ser de 80 μl, 50 μl, 30 μl i 30 μl per a les quatre mostres respectivament. Es van carregar 3 μl de l'eluat per carril.
MIII: marcador TIANGEN III;
L'electroforesi es va dur a terme a 6 V / cm durant 30 minuts amb una agarosa a l'1%.
Resultats: El reactiu universal TIANGEN TRNzol pot extreure RNA d’alta puresa i bona integritat a partir de fetge de rata, fulles d’arròs, cèl·lules cultivades i mostres de llevat, amb alta eficiència. La qualitat de l’ARN és comparable o lleugerament superior a la dels productes L i T.
A-1 La lisi o homogeneïtzació cel·lular no és suficient
---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.
A-2 La quantitat de mostra és massa gran
---- Reduir la quantitat de mostra utilitzada o augmentar la quantitat de tampó de lisi.
A-1 Lisi o homogeneïtzació cel·lular insuficients
---- Reduir l'ús de mostres, augmentar la quantitat de tampó de lisi, augmentar l'homogeneïtzació i el temps de lisi.
A-2 La quantitat de mostra és massa gran
---- Consulteu la capacitat màxima de processament.
L’ARN A-3 no s’elueix completament des de la columna
---- Després d'afegir aigua lliure de RNasa, deixeu-la uns minuts abans de centrifugar-la.
A-4 Etanol a l'eluent
---- Després d’esbandir, centrifugueu de nou i traieu el tampó de rentat tant com sigui possible.
A-5 El medi de cultiu cel·lular no s’elimina completament
---- Quan recopileu cèl·lules, assegureu-vos d’eliminar el medi de cultiu al màxim.
A-6 Les cèl·lules emmagatzemades a RNAstore no es centrifugen eficaçment
---- La densitat de magatzem d’ARN és superior a la mitjana de cultiu cel·lular; de manera que s’hauria d’incrementar la força centrífuga. Es suggereix centrifugar a 3000x g.
A-7 Baix contingut i abundància d'ARN a la mostra
---- Utilitzeu una mostra positiva per determinar si la mostra produeix un baix rendiment.
A-1 El material no és fresc
---- Els teixits frescos s’han d’emmagatzemar en nitrogen líquid immediatament o immediatament posats al reactiu RNAstore per garantir l’efecte d’extracció.
A-2 La quantitat de mostra és massa gran
---- Reduir la quantitat de mostra.
A-3 RNase contamination
---- Tot i que la memòria intermèdia proporcionada al kit no conté RNasa, és fàcil contaminar-la durant el procés d’extracció i s’ha de manipular amb cura.
A-4 Contaminació per electroforesi
---- Substituïu la memòria intermèdia d'electroforesi i assegureu-vos que els consumibles i la memòria intermèdia de càrrega estiguin lliures de contaminació per RNase.
A-5 Massa càrrega per electroforesi
---- Reduïu la quantitat de càrrega de la mostra, la càrrega de cada pou no hauria de superar els 2 μg.
A-1 La quantitat de mostra és massa gran
---- Reduir la quantitat de mostra.
A-2 Algunes mostres tenen un alt contingut d’ADN i es poden tractar amb DNasa.
---- Realitzeu un tractament amb DNasa sense RNasa a la solució d’ARN obtinguda, i l’ARN es pot utilitzar directament per a experiments posteriors després del tractament o es pot purificar amb kits de purificació d’ARN.
Per a vidres, cuits a 150 ° C durant 4 h. Per a envasos de plàstic, submergits en NaOH 0,5 M durant 10 min, després esbandits a fons amb aigua sense RNasa i esterilitzeu-los per eliminar completament la RNasa. Els reactius o solucions utilitzats a l’experiment, especialment l’aigua, han d’estar lliures de RNasa. Utilitzeu aigua lliure de RNasa per a totes les preparacions de reactius (afegiu aigua a una ampolla de vidre neta, afegiu DEPC a una concentració final del 0,1% (V / V), agiteu durant la nit i feu l'autoclau).
Des de la seva creació, la nostra fàbrica ha estat desenvolupant productes de primer nivell mundial seguint el principi
de qualitat primer. Els nostres productes han guanyat una excel·lent reputació a la indústria i una confiança valuosa entre clients nous i antics.