Kit d’ADN circulant de sèrum / plasma

A-1 Baixa concentració de cèl·lules o virus a la mostra inicial: enriquir la concentració de cèl·lules o virus.

A-2 Lisi insuficient de les mostres: les mostres no s'han barrejat bé amb el tampó de lisi. Es recomana barrejar bé polsant per vòrtex 1-2 vegades. —Lisis cel·lular insuficient causada per la disminució de l’activitat de la proteïnesa K. —Lisi cel·lular insuficient o degradació de proteïnes a causa d’un temps de bany calent insuficient. Es recomana tallar el teixit en trossos petits i allargar el temps del bany per eliminar tots els residus del lisat.

A-3 Adsorció d’ADN insuficient. —No s’hi va afegir etanol ni un percentatge baix en lloc d’un 100% d’etanol abans de transferir el lisat a la columna de gir.

A-4 El valor del pH del tampó d'elució és massa baix. —Ajusteu el pH entre 8,0-8,3.

Etanol residual a l'eluent.

—Hi ha un amortidor de rentat residual PW a l'eluent. L'etanol es pot eliminar centrifugant la columna de centrifugació durant 3-5 min i després col·locant-lo a temperatura ambient o incubadora de 50 for durant 1-2 min.

A-1 La mostra no és fresca. —Extreu un ADN positiu de la mostra com a control per determinar si l’ADN de la mostra s’ha degradat.

A-2 Pre-tractament incorrecte. —Causat per una mòlta excessiva de nitrogen líquid, la recuperació d’humitat o una quantitat massa gran de la mostra.

Els pretractaments haurien de variar segons les mostres. Per a mostres de plantes, assegureu-vos de triturar bé en nitrogen líquid. Per a mostres d'animals, homogeneïtzar o moldre a fons en nitrogen líquid. Per a mostres amb parets cel·lulars difícils de trencar, com ara bacteris G + i llevats, es recomana utilitzar lisozima, lyticasa o mètodes mecànics per trencar les parets cel·lulars.

El kit d'ADN genòmic vegetal 4992201/4992202 adopta un mètode basat en columnes que requereix cloroform per a l'extracció. És especialment adequat per a diverses mostres de plantes, així com per a pols seca de plantes. El kit de plantes Hi-DNAsecure també es basa en columnes, però no necessita extracció de fenol / cloroform, cosa que el fa segur i no tòxic. És adequat per a plantes amb alt contingut de polisacàrids i polifenols. 4992709/4992710 DNAquick Plant System adopta un mètode basat en líquids. L’extracció de fenol / cloroform tampoc no és necessària. El procediment de purificació és senzill i ràpid, sense límit per als imports inicials de la mostra, de manera que els usuaris poden ajustar la quantitat de manera flexible segons els requisits experimentals. Es poden obtenir grans fragments de gDNA amb un alt rendiment.

L’ADN genòmic es va extreure de diferents volums de mostres de sang sencera humana mitjançant el kit d’ADN de sang TIANamp. Els resultats són els següents. Els resultats s’enumeren només com a referència, els resultats reals de l’extracció depenen de les condicions de les mostres.

L'extracció d'ADN de coàguls de sang es pot realitzar utilitzant els reactius proporcionats en aquests dos kits simplement canviant el protocol a la instrucció específica per a l'extracció d'ADN de coàguls de sang. La còpia en paper del protocol d’extracció d’ADN de coàguls de sang es pot emetre quan se sol·licita.

Suspeneu la mostra fresca amb 1 ml de PBS, sèrum fisiològic normal o tampó TE. Homogeneïtzar completament la mostra mitjançant un homogeneïtzador i recollir el precipitat al fons d’un tub mitjançant centrifugació. Elimineu el sobrenedant i torneu a suspendre el precipitat amb 200 μl de tampó GA. La següent purificació d’ADN es pot realitzar segons la instrucció.

Per a la purificació d’ADNc en mostres de plasma, sèrum i líquids corporals, es recomana TIANamp Micro DNA Kit. Per a la purificació del virus d’ADNc a partir de mostres de sèrum / plasma, es recomana el kit d’ADN / ARN del virus TIANamp. Per a la purificació d’ADNc bacterià a partir de mostres de sèrum i plasma, es recomana el TIANamp Bacteria DNA Kit (s’ha d’incloure lisozima per a bacteris positius). Per a mostres de saliva, es recomana el kit d’ADN Hi-Swab i el kit d’ADN TIANamp Bacteria.

Es recomana el kit de plantes DNAsecure o el sistema de plantes DNAquick per a l'extracció del genoma de fongs. Per a l'extracció del genoma del llevat, es recomana el kit d'ADN de llevat TIANamp (la licasi s'ha de preparar per si sola).